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培養(yǎng)細胞無菌操作注意事項

培養(yǎng)原代細胞無菌操作注意事項1、操作原代細胞進行培養(yǎng)時，動作要準確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動，增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便，工作臺面上的用品要有合理的布局，原則上應(yīng)是右手使用的東西放置在右側(cè)，左手用品在左側(cè)，酒精燈置于中央。工作由始至終要保持一定順序性，組織或細胞在未做處理之前，勿過早暴露在空氣中。同樣，培養(yǎng)液在未用前，手或相對較臟的物品不能經(jīng)過開放的瓶口上方，瓶口zui易污染，加液時如吸管尖碰到瓶口，則應(yīng)將吸...

細胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶（LDH）釋放法

細胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶（LDH）釋放法LDH是活細胞漿內(nèi)酶，當細胞損傷，細胞膜通透性變化時，會將LDH釋放到培養(yǎng)液中。因此培養(yǎng)液中該酶的活性與被裂解的細胞系數(shù)量成正比。由LDH催化的酶促反應(yīng)在催化乳酸生成丙酮酸的過程中使氧化型輔酶I（NAD）變成還原型輔酶I（NADH+H），后者再通過遞氫體一吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氯唑（INT），INT接受氫離子被還原成紫紅色的化合物，酶標儀檢測其OD值。與結(jié)晶紫染色法和MTT比色法進行靈敏度、重復(fù)性和相關(guān)性比較，...

原代細胞取材的基本要求和注意事項

原代細胞取材的基本要求和注意事項人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，是進行細胞培養(yǎng)的*步，若取材不當，將會直接影響細胞的體外培養(yǎng)，現(xiàn)將取材的基本要求和注意事項敘述如下：一、取材的基本要求（1）取材要注意新鮮和保鮮新鮮組織易于培養(yǎng)成功，取材時應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細胞，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時培養(yǎng)，應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，于4℃存放。若組織塊較大，應(yīng)在清除表面血、壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋...