技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究開發(fā)和工業(yè)化動物細(xì)胞株(雜交瘤細(xì)胞、CHO細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等)大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)及其生物反應(yīng)器工程可廣泛應(yīng)用于抗體、基因重組蛋白質(zhì)藥物、病毒疫苗等生物技術(shù)產(chǎn)品的研究開發(fā)和工業(yè)化,長期以來得到國家重大科技攻關(guān)計(jì)劃、863計(jì)劃等的大力支持,擁有一支精干的研究開發(fā)團(tuán)隊(duì)和一系列現(xiàn)代化設(shè)備儀器,建立了由無血清懸浮培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)過程及生物反應(yīng)器設(shè)計(jì)放大與強(qiáng)化技術(shù)、大規(guī)模高密度流加和連續(xù)灌注培養(yǎng)技術(shù)、培養(yǎng)過程計(jì)算機(jī)實(shí)時(shí)監(jiān)測與控制技術(shù)、病毒類產(chǎn)品大規(guī)模技術(shù)等核心技術(shù)組成的大規(guī)模...
人類體細(xì)胞染色體標(biāo)本制備實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟實(shí)驗(yàn)原理染色體是在顯微鏡下可見原代細(xì)胞有絲分裂過程中出現(xiàn)的結(jié)構(gòu)。因此,必須獲得染色體標(biāo)本才能進(jìn)行檢查分析,通常情況下,都是利用外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行核型分析。正常情況下,人體外周血淋巴細(xì)胞不再分裂,但植物血凝素(PHA)可刺激血中的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化成淋巴母細(xì)胞,使其恢復(fù)增殖能力。因此,可采取少量外周靜脈血,做短期培養(yǎng),培養(yǎng)至72小時(shí)細(xì)胞進(jìn)入增殖旺盛期,此時(shí)加入秋水仙素抑制細(xì)胞分裂,使細(xì)胞分裂停止在中期以獲得足夠量的分裂期細(xì)胞,經(jīng)低滲、固定、制...
培養(yǎng)原代細(xì)胞時(shí)哪些問題需要注意1.原代細(xì)胞用1640加10%胎牛血清,有的種系用DMEM.血清要求質(zhì)量較高,在普通血清中細(xì)胞生長不太好。1640用雙蒸水溶解,按說明加入碳酸氫鈉。2.培養(yǎng)液中應(yīng)加入HEPES,起緩沖pH值的作用,否則會影響細(xì)胞狀態(tài)。如果用20%的HEPES,每次配培養(yǎng)液時(shí)每200ml培養(yǎng)液可加入5ml.加入HEPES后1640培養(yǎng)液顏色略呈橘黃色而非暗紅色。3.消化所用胰酶可選擇0.125%濃度,且不要消化時(shí)間太長。也有研究者認(rèn)為不用胰酶,直接吹打使細(xì)胞脫壁,...
造血干細(xì)胞的基本特性造血干細(xì)胞的多向分化潛能使造血干細(xì)胞分化為各類祖細(xì)胞系,祖細(xì)胞又可以分化為各種類型的血細(xì)胞。在造血干細(xì)胞發(fā)育、成熟的過程中,除了分化為成熟的細(xì)胞,部分細(xì)胞會衰老、死亡。為了維持終生造血,造血干細(xì)胞會不斷地進(jìn)行自我更新。但是在一次次的DNA復(fù)制和細(xì)胞分裂中又增加了突變的可能。在成體中,70%的HSC處于靜息狀態(tài),這種狀態(tài)可使終生存在的造血干細(xì)胞可以盡可能減少由于增殖帶來的基因組不穩(wěn)定性,降低細(xì)胞應(yīng)激帶來的傷害。當(dāng)造血干細(xì)胞受到信號刺激時(shí),靜息的造血干細(xì)胞就會...
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)分析克隆化的細(xì)胞可以在體外進(jìn)行大量培養(yǎng),收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限,其不能超過特定的細(xì)胞濃度,且每天要換培養(yǎng)液。而體內(nèi)雜交瘤細(xì)胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細(xì)胞具有從親代淋巴細(xì)胞得來的腫瘤細(xì)胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小鼠(無胸腺的裸鼠),雜交瘤細(xì)胞就開始無限地繁殖,直至宿主死亡。產(chǎn)生腫瘤細(xì)胞的小鼠腹水和血清中含有大量的雜交瘤細(xì)胞分泌的單克隆抗體,這種抗體的效價(jià)往往高于培養(yǎng)細(xì)胞上清液...
體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化1、差異:細(xì)胞系離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動態(tài)平衡的相對穩(wěn)定環(huán)境中,日久天長,易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無限生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開始發(fā)生了。雖然體外細(xì)胞與機(jī)體細(xì)胞存...
選購細(xì)胞株需要考慮哪幾個(gè)因素1、細(xì)胞株的生物等級,由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品,所以從國外購貨比較麻煩。2、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料,以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡,甚至于被退回給發(fā)貨人。選購細(xì)胞株注意事項(xiàng)3、在購買國外細(xì)胞株時(shí),需交待國外加比較多的干冰一般在13公斤以上,采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。4、如果通過國外細(xì)胞株在國內(nèi)的代理商購買的話,合同中需注明以下一些內(nèi)容:1).明確的到貨時(shí)間,這個(gè)時(shí)間需注明的是工作日,還是普通日。2).在接到細(xì)胞株后,要求...
原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個(gè)方面學(xué)習(xí)*、認(rèn)識原代細(xì)胞生物學(xué)課程的重要性,正如原子是物理性質(zhì)的zui小單位,分子是化學(xué)性質(zhì)的zui小單位,細(xì)胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎大都授予了從事細(xì)胞生物學(xué)研究的科學(xué)家,可見細(xì)胞生物學(xué)的重要性。如果你將來打算從事生物學(xué)相關(guān)的工作,學(xué)好細(xì)胞生物學(xué)能加深你對生命的理解。第二、明確細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容,即:結(jié)構(gòu)、功能、生活史。生物的結(jié)構(gòu)與功能是相適應(yīng)的,每一種結(jié)構(gòu)都有特定的功能,每一種功能的實(shí)現(xiàn)都需要特定的物質(zhì)基礎(chǔ)。如肌肉可以收縮、...
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