商品屬性：

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 人肺癌成纖維細胞

組織來源 肺癌組織

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

細胞簡介 人肺癌成纖維細胞分離自肺癌組織；肺癌是常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤，絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮，故亦稱支氣管肺癌。肺癌可向四周乃至全身擴散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長快，對人群健康和生命威脅的惡性腫瘤之一。近50年來許多國家都報道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的一位，女性發(fā)病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不明確，大量資料表明，長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系。肺癌，其實不是一種病，而是幾十種病的組合，有多種亞型，多種特性；根據(jù)肺癌細胞在顯微鏡下的形態(tài)特點，可以初步分為兩種類型：小細胞肺癌（SCLC）15%和非小細胞肺癌（NSCLC）85%。這兩種類型肺癌的生長特點、擴散風險和治療方案均不相同。絕大多數(shù)肺癌是非小細胞肺癌，約占85%。它又能進一步被分為三類，分別是：腺癌，鱗癌和大細胞癌。其中腺癌是主要的類型，約占非小細胞肺癌中的50%。如果是不吸煙的女性患者，幾乎全部都是腺癌。人肺癌成纖維細胞是肺癌組織中的癌相關(guān)成纖維細胞，癌相關(guān)成纖維細胞（cancer associated fibroblast，CAF）在腫瘤微環(huán)境中的重要作用已受到廣泛的重視。該細胞通過與癌細胞的直接接觸、分泌多種因子以及對腫瘤基質(zhì)的改造，促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移甚至耐藥性的發(fā)生。隨著研究的深入，有人提出CAF可能成為抗的新靶點。然而CAF的分化來源多樣，相應的形態(tài)和功能各異，因此深入了解CAF的分化來源有利于更全面地認識腫瘤發(fā)展的機制，為臨床治療提供理論依據(jù)，體外培養(yǎng)肺癌成纖維細胞對肺癌研究有重要意義。

方法簡介 實驗室分離的人肺癌成纖維細胞采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10? cells/瓶。

質(zhì)量檢測 實驗室分離的人肺癌成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

自備試劑： 0.25%  、PBS  、培養(yǎng)基

培養(yǎng)基： 人肺癌成纖維細胞培養(yǎng)基(含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等)

換液頻率： 每2-3天換液一次

生長特性： 貼壁

細胞形態(tài)： 成纖維細胞樣

傳代比例： 1:2

傳代特性： 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

原代細胞培養(yǎng)步驟：

取材與預處理?：取新生24小時內(nèi)Wistar大鼠，麻醉后無菌取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管?。

?消化?：剪碎肺組織，依次用0.2%膠原酶（37℃震蕩1h）和0.5%酶（消化30min）消化，終止后過濾?。

?純化?：采用IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后重懸接種?。

?培養(yǎng)?：使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基，37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液?。

培養(yǎng)方法?：

原代細胞培養(yǎng)?

?材料?：新生大鼠肺組織、0.2%膠原酶、0.5%酶、DMEM培養(yǎng)基（含10%胎牛血清）。

?步驟?：

取出肺組織，PBS沖洗去除血管和氣管，剪碎。

依次用膠原酶（37℃震蕩1h）和酶（消化30min）消化，終止后過濾。

通過IgG吸附法去除未貼壁細胞，離心后接種于培養(yǎng)皿。

37℃、5% CO?培養(yǎng)，24小時后換液。

?注意事項?：消化時間需嚴格控制（胎鼠25分鐘，新生鼠40-60分鐘），避免過度消化導致細胞死亡。

?細胞系培養(yǎng)?

?傳代?：0.25%消化1-2分鐘，加入含血清培養(yǎng)基終止，按1:2-1:4比例傳代。

?條件?：DMEM+10%胎牛血清，每周換液2-3次，37℃、5% CO?培養(yǎng)。

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