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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒50T鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

更新時(shí)間:2020-09-29
廠商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪問(wèn)量:412
產(chǎn)品型號(hào):50T
詳細(xì)介紹在線留言

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱(chēng):Mouse Pox Virus(MPV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛勘J匦蛄性O(shè)計(jì)的專(zhuān)一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品:
Tanshinone I腫瘤壞死因子受體超家族成員18檢測(cè)試劑盒2mg

 SF17(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Cryptotanshinone腺嘌呤標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)Polyclonal Antibody 0.2ml

人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM) ELISA試盒UBE2M  泛素蛋白連接酶M抗體規(guī)格:96T/48TAdenosine規(guī)格:350mgapelin 36檢測(cè)試盒20mg人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCIH460細(xì)胞1x10^6cells

98%25g1g高黃綠111966Carotene

3-異倒捻子素 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 3-isomangostin

Sodium DanshensuS-腺苷-L-高半胱氨標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人血小板解整合素樣金屬蛋白酶20(ADAMTS20)Polyclonal Antibody 0.2ml

人血小板衍化生長(zhǎng)子(PDGF)UBE2Q1  泛素蛋白連接酶Q1抗體規(guī)格:96T/48TAgigenin規(guī)格:25mgArgonaut2蛋白檢測(cè)試盒20mg人膽管癌細(xì)胞,HuH28細(xì)胞1x10^6cells

5羥基色氨2× SYBR Green qPCR 試劑盒5mg

羅紅霉素 規(guī)格: HPLC≥98%;200mg 訂購(gòu)|咨詢(xún) 人無(wú)孢蛋白(ASPN)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(NRG2)ELISA試劑盒,英文名:NRG2 ELISA Kit

Horse IgG  (親和純化) 馬IgG*N酰輔酶A檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒4774145

花青素RibaGreen(效果同RiboGreen)RNA 定量檢測(cè)試劑 *2000次*5mg

迷迭香;Rosmarinic acid 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 20mg 絲/蘇氨蛋白質(zhì)激酶抗體 MCH ELISA Kit 黑色素濃縮激素(MCH)ELISA試劑盒

Horse IgM  (親和純化) 馬IgM進(jìn)口、分裝琥珀酰輔酶A檢測(cè)試盒10gHuman/人Elisa試盒477535436

花青素RibaGreen(效果同RiboGreen)RNA 定量檢測(cè)試劑 *2000次*5mg

烏拉地爾雜質(zhì)A 訂購(gòu)|咨詢(xún) 規(guī)格: 20mg 人醇羧激酶(PEPCK-C)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒,英文名:α2-MG ELISA Kit

human IgG  (親和純化) 人IgG進(jìn)口、原裝組蛋白檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒477600752
鼠痘病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒L亮氨 ;LLeucine CAS號(hào): 61905 規(guī)格: 100mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

氨葡萄糖;Glucosamine CAS號(hào): 14999430 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

辣椒堿;Capsaicin CAS號(hào): 404864 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

蓮心堿高氯鹽;Liensinine p CAS號(hào): 5088904 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

羅通定;Rotundine CAS號(hào): 10097844, 2934976 規(guī)格: 50mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

洛伐他汀;Lovastatin CAS號(hào): 75330755 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

氯兩面針堿;Nitidine Chlo CAS號(hào): 13063042 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

遼東楤木皂苷Ⅶ;Araloside VI CAS號(hào): 340982221 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

遼東楤木皂苷Ⅴ;Araloside V CAS號(hào): 340963862 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X CAS號(hào): 344911906 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

辛;Lipoic acid CAS號(hào): 62464 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

羅丹明B;Rhodamine B CAS號(hào): 81889 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

六羧;DLPipecolini CAS號(hào): 535751 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

絡(luò)塞維;Rosavin CAS號(hào): 84954927 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)

諾米林;nomilin CAS號(hào): 1063770 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。

 

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