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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒50T綿羊皰疹病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒

綿羊皰疹病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

綿羊皰疹病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

更新時(shí)間:2020-09-30
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:454
產(chǎn)品型號(hào):50T
詳細(xì)介紹在線留言

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、綿羊皰疹病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:綿羊皰疹病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱:Ovine Herpesvirus(OHV)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見(jiàn)使用方法)。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛勘J匦蛄性O(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Geniposide異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D檢測(cè)試劑盒20mg

普拉克索堿 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% Pramipexole Base

Phytic acid1,6-脫水吡喃葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人氨肽酶O(AP-O)ELISA試劑盒 0.2ml

人白介素12(IL12)(P70) RED/CSA2  軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體規(guī)格:96T/48TApraclonidine Hydrochloride規(guī)格:10mgMxA蛋白檢測(cè)試盒20mg人淋瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞1x10^6cells

Paclitaxel異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E檢測(cè)試劑盒20mg

 糖肉湯培養(yǎng)基/Lactose Broth Medium用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)前增菌;大腸菌群的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

gentiopicrin阿尼利定標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格:規(guī)格:人AP-1復(fù)合體亞基mu-1(AP-1 complex subunit mu-1)ELISA試劑盒 0.2ml

人白介素12(IL12)(P40)ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4  血管生成素3/血管生成素4抗體規(guī)格:96T/48TAprepitant規(guī)格:125mgNADH細(xì)胞色素b5還原酶檢測(cè)試盒20mg人淋母細(xì)胞,T2 (174xcem.T2 )細(xì)胞1x10^6cells

98%5g5g果膠酶Y23mumps virus antibody

 Toll樣受體9(TLR9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Toll Like Receptor 9 (TLR9)

ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(723)  促上腺皮質(zhì)激素(723)(抗原)進(jìn)口、分裝α2干擾素檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒494199

97%50mg5ml果膠酶Y23Mhyopneumoniae

標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6% Tsumacide solution

Actin Alpha /AlphaSMA (Actin alpha , smooth muscle aorta)  肌動(dòng)蛋白(抗原)進(jìn)口、原裝5羥色胺3檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒494227337

98%10mg5g果膠酶Poliovirus IgA antiobody

 亞鹽-多粘菌素-磺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS) 規(guī)格: 250g 用途: 用于食品和礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(GB/T 8538-2008,GB/T4789.28-2003中4.69,GB/...

AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1)  脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1現(xiàn)貨供應(yīng)5羥色胺4檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4942476
綿羊皰疹病毒通用探針?lè)晒舛縋CR試劑盒芥子堿鹽 CAS號(hào): 7431778 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

α三聯(lián)吩 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

香荊芥 CAS號(hào): 499752 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg 訂購(gòu)|咨詢

正壬 CAS號(hào): 112129 規(guī)格: HPLC≥95%;0.1ml 訂購(gòu)|咨詢

對(duì)氧肉桂 CAS號(hào): 1929302 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

大蒜素 CAS號(hào): 539866 規(guī)格: UV≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫萁 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

漿苦味素L CAS號(hào): 113146740 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

相思子堿 CAS號(hào): 21339559 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

王不留行黃苷 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

阿多尼弗林堿 CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

旱蓮苷A CAS號(hào):  規(guī)格: HPLC≥95%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫蘇 CAS號(hào): 539526 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

苦素 CAS號(hào): 125675094 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

西瑞香素 CAS號(hào): 2034697 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。

 

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