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當前位置:首頁產(chǎn)品中心定量PCR試劑盒探針法熒光定量PCR試劑盒50T海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品簡介

海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

更新時間:2020-09-29
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:439
產(chǎn)品型號:50T
詳細介紹在線留言

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium marinum
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

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實驗過程:
一、海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設(shè)置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
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90%100g25g5基鐵屎米123637activated coagulation factor X

秦皮甲素  英文名稱:Isopsoralen   保存:-20℃   規(guī)格:20mg 化蛋白酪氨酶1C抗體

GATA結(jié)合蛋白3(GATA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 BTN3A3 蛋白 (Fc 標簽)*250(g)

人尿激酶型血漿酶原激活子(PA)GCLC/GCLM  γ谷氨酰半胱氨合成酶抗體(γGCSc)規(guī)格:96T/48TAlliin規(guī)格:15mgC1q腫瘤壞死子相關(guān)蛋白1檢測試盒20mg人肺鱗癌細胞,NCIH520細胞1x10^6cells

90%5g5g黃芩素 6O葡萄糖苷35796activated coagulation factor Ⅻ

絞股藍皂苷XLIX 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支 Bcl-2樣蛋白2抗體 PGI ELISA Kit 前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒

鈣非依賴性脂酶A2(iPLA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)重組人 LRG1 蛋白*250(g)

人8異前列腺素F2α(8ISOPGF2a)GCOM1  GCOM1蛋白抗體規(guī)格:96T/48TAllopurinol規(guī)格:200mgCaATP酶檢測試盒0.5ml人肺鱗癌細胞,NCIH1703細胞1x10^6cells

5羧基熒光素(單一化合物)5mg

9,10-二蒽(>96.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC) 9,10-Dichloroanthracene 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae煙色紅曲 Monascus fuliginosus

Goat Antihuman IgG Whole serum  羊抗人IgG抗血清進口、原裝素檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒4801585

2α羥基熊果5羧基熒光素(單一化合物)5mg

Alfa-葡萄素;alpha-Vinif 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢 NCI-H358(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion

Goat Antihuman IgM Whole serum  羊抗人IgM抗血清現(xiàn)貨供應周期素依賴性激酶抑制子1A檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒480424702

98%500g25g維生素B1定性檢測試劑盒(重氮化氨基磺法)Recombinant Nucleobindin 2

土荊皮乙;土荊乙; 土槿皮乙 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 人糖原化酶B(PYGB)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠Toll樣受體9(TLR9)ELISA試劑盒,英文名:TLR9 ELISA Kit

Goat Antihuman IgA Whole serum  羊抗人IgA抗血清*細胞色素P4503A4檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒480424702
海魚分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒橄欖苦苷;Oleuropein CAS號: 32619424 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

佛手柑素;Bergamotine CAS號: 7380407 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

西紅柿堿;Tomatine CAS號: 17406450 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢

非洲防堿;Columbamine CAS號: 3621361 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

佛司可林;Forskolin CAS號: 66575299 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

伏格列波糖;Voglibose CAS號: 83480299 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

肥皂草素;Saponin CAS號: 8047152 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

法卡林二;Falcarindiol CAS號: 55297875 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

蜂斗菜內(nèi)A;Bakkenolide A CAS號: 19906720 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

風信子素;2(1Ethoxyetho CAS號:  規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

覆盆子;4(4Hydroxyphe CAS號: 5471512 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

番瀉苷D;Sennoside D CAS號: 37271173 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

番瀉苷C;Sennoside C CAS號: 37271162 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

附子靈;Fuziline CAS號:  規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

飛蓬;Erigoster B CAS號:  規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢

 

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