【產(chǎn)品名稱】蜜蜂微孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Nosema spp.
【產(chǎn)品編號(hào)】YSP7021
【包裝規(guī)格】50T
【預(yù)期用途】
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測(cè)，所用儀器為實(shí)時(shí)熒光PCR儀，可通過實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒采用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對(duì)鴨源性成分核酸序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針，通過實(shí)時(shí)熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對(duì)鴨源性成分核酸進(jìn)行定性檢測(cè)。
*的擴(kuò)增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優(yōu)化的反應(yīng)體系保證更高的擴(kuò)增效率。以相同量的293T細(xì)胞cDNA為模板，擴(kuò)增β-actin基因，與同類產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴(kuò)增信號(hào)更強(qiáng)，擴(kuò)增效率更高。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
蜜蜂微孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

實(shí)驗(yàn)步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
98%250mg500g苦參醇Alphafetoprotein

土槿皮-O-β-D-葡萄糖苷 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢 人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒，英文名：DNMT1 ELISA Kit

骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 PROC1 / Protein C / PROC 蛋白 (His 標(biāo)簽)*250(g)

ANG II (Human angiotension II ) ELISA Kit  人血管緊張素ⅡCAS號(hào)：107007954 糞卟啉原Ⅲ檢測(cè)試盒500gHuman/人Elisa試盒30751054

98%500g25g蒿草酚A19333109Methionine

檸檬無(wú)水 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR Citric acid 糖化酵母 Saccharomyces diastaticus人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基

Icariin阿莫地鹽鹽標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)格：規(guī)格：人Apelin 13(APLN13)CLIA試劑盒 0.2ml

Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit  人帕金森氏病2ParkinCAS號(hào)：707 原卟啉Ⅸ檢測(cè)試盒100gHuman/人Elisa試盒30766224

D蟲熒光素鈉鹽  5mg

dATP,三脫氧腺苷鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 2'-Deoxyadenosine 5'-triphosphate disodium salt 微黃八疊球菌 Sarcina subflava微紫青霉 Penicillium janthinellum

AACT(Alpha1Antichymotrypsin)  α1抗胰糜蛋白酶進(jìn)口、原裝Wnt10b蛋白檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒4920347

D蟲熒光素鈉鹽  5mg

7-乙基-10羥基喜樹堿 訂購(gòu)|咨詢 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Heparan sulfate小鼠胱天蛋白酶7(CASP7)ELISA試劑盒，英文名：CASP7 ELISA Kit

AACT protein(Alpha chymotrypsin protein)  胰糜蛋白酶現(xiàn)貨供應(yīng)布魯頓酪氨激酶檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒492080

D蟲熒光素鈉鹽  5mg

二十五(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC) Pentacosane

ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(139)  促上腺皮質(zhì)激素(139)（抗原）*內(nèi)源性大麻素檢測(cè)試盒5gHuman/人Elisa試盒492273
蜜蜂微孢子蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒去吳茱萸堿 CAS號(hào)： 67909493 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

青酶 CAS號(hào)： 9001745 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

千金子甾 CAS號(hào)： 28649594 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

原阿堿 CAS號(hào)： 128397411 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

7羥5,8二氧黃 CAS號(hào)： 54377241 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

10羥攀援山橙堿 CAS號(hào)： 119188475 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

去氧穿心蓮內(nèi) CAS號(hào)： 79233151 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

羥芫花素 CAS號(hào)： 20243598 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

7羥馬兜鈴A CAS號(hào)： 79185754 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

5羥馬鞭草苷 CAS號(hào)： 50816245 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

去氧醉椒素 CAS號(hào)： 15345898 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢

去駱駝蓬堿 CAS號(hào)： 442513 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

青琥 CAS號(hào)： 88495630 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg 訂購(gòu)|咨詢

曲克蘆 CAS號(hào)： 7085554 規(guī)格： HPLC≥98%;100mg 訂購(gòu)|咨詢

高烏素 CAS號(hào)： 97792455 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
產(chǎn)品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。