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產(chǎn)品名稱：植酸酶（phytase）試劑盒品牌

規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣

測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法

貨號(hào)：YS-01S6645

測(cè)定意義

植酸酶（phytase）是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸（鹽）的一類酶的總稱，屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷，降低糞便中的磷含量，減輕對(duì)環(huán)境的污染，改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用，因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。

測(cè)定原理

植酸酶在一定溫度和pH值條件下，水解底物植酸鈉生成無機(jī)磷與肌醇衍生物，無機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物，在700nm處有特征吸收峰，根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋，超聲溶解器，回旋式振蕩器。

樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 。

4 ）. 加氫氧化鉀或*將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

特點(diǎn):

(1)應(yīng)用廣泛

由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)靈敏度高

由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。

(3)選擇性好

目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。

(4)準(zhǔn)確度高

對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。

(5)適用濃度范圍廣

可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。

(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

Anti-Profilin 1/FITC 熒光素標(biāo)記前纖維蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc Whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

白細(xì)胞介素-18/干擾素γ誘導(dǎo)因子抗體 Anti-IL-18/IGIF 0.1ml

Rabbit anti-mouse IgM whole serum 兔抗小鼠IgM抗血清 1ml

FACL4 英文名稱： ?；鵄合成酶4抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PTPN11 (Tyr584) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc Whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml

IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰A羧化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 規(guī)格 0.1ml

雞血清蛋白干粉 10mg/50mg 國(guó)產(chǎn)

WAPL 英文名稱： EBV核蛋白2抗體 0.2ml

phospho-DDX58 (Ser8) 英文名稱： 磷酸化DDX58抗體 0.1ml

Anti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰A羧化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

SV2B 英文名稱： 突觸泡蛋白2B抗體 0.2ml

ELL 英文名稱： 聚合酶延伸因子抗體 0.2ml

CBX5抗體 Anti-CBX5 0.1ml

Anti-ULBP3/N2DL3/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H2A.X (Tyr143) 磷酸化組蛋白H2AX抗體 規(guī)格 0.1ml

ZCWCC1(Zinc finger CW-type coiled-coil domain protein 1) ZCWCC1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
植酸酶（phytase）試劑盒品牌磺醋酰(標(biāo)準(zhǔn)品)氯波必利組織蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

磺喹噁啉(標(biāo)準(zhǔn)品)異丁司特組織樣品組織蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

磺氯吡(標(biāo)準(zhǔn)品)醋氨己酸鋅血液組織蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

泰妙菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)異環(huán)磷酰體液組織蛋白酶B（CATHEPSIN B）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

甲酸銨(用于質(zhì)譜,≥99.0%)二酸倍他米松組織蛋白酶D（CATHEPSIN D）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

苯甲(色譜級(jí), ≥99.5%(GC))氯沙坦組織樣品組織蛋白酶D（CATHEPSIN D）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

甲基叔丁基(農(nóng)殘級(jí),≥99.9%(GC）)氟他組織蛋白酶H（CATHEPSIN H）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

甲基叔丁基(GC,≥99.9%(GC))鹽酸氨溴索組織樣品組織蛋白酶H（CATHEPSIN H）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。