產(chǎn)品名稱：大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10225

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
B7-2/sCD86 ELISA Kit 大鼠可溶性CD86Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 VEGFR1 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh gamma Synuclein 核突觸蛋白-γ抗體 規(guī)格 0.1ml

EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人腺來(lái)源的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 96T

NOX2 英文名稱： NADPH氧化酶2抗體 0.1ml

phospho-ATG3 (Tyr18) 英文名稱： 磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 0.1ml

 VEGFR1 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Testosterone 小鼠睪酮Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Fe65 protein/APBB1 鐵蛋白Fe65抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Mouse  rat IgG ascites 小鼠抗大鼠IgG腹水 規(guī)格 1ml

ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit 人上皮特異性抗原 96T

SCAP2 英文名稱： Src家族相關(guān)磷酸化蛋白2抗體 0.1ml

C4orf19 英文名稱： 4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體 0.2ml

 Fe65 protein/APBB1 鐵蛋白Fe65抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Mouse  Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

phospho-GABBR2 (Ser892) 英文名稱： 磷酸化G基丁酸B型受體2抗體 0.1ml

內(nèi)收蛋白抗體  Adducin protein 0.2ml

 Phospho-Myt1 (Ser83) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Protein S/PROS 蛋白S抗體 規(guī)格 0.2ml

 VAMP-3/FITC 熒光素標(biāo)記囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基通用型乙酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次通道蛋白抗體流式組化

細(xì)胞乙酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次癌易感基因2抗體流式組化

組織短鏈烯脂酰A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次內(nèi)皮素-1抗體流式組化

組織中鏈烯脂酰A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次G蛋白/鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白抗體流式組化

組織長(zhǎng)鏈烯脂酰A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次整合素αE2抗體流式組化

細(xì)胞短鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次瘦素抗體流式組化

細(xì)胞中鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次平足蛋白抗體流式組化

細(xì)胞長(zhǎng)鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次鼠抗人泌乳素抗體流式組化

組織短鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次凋亡抑制因子抗體流式組化

組織中鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體流式組化

組織長(zhǎng)鏈羥脂酰A脫氫酶（HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次甲狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1/甲狀腺特異增強(qiáng)子結(jié)合蛋白抗體流式組化

細(xì)胞短鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次L-精L-谷鹽

細(xì)胞中鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次肌酶

細(xì)胞長(zhǎng)鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次托普霉素

組織短鏈酮脂酰A硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次5-尿苷三磷酸鈉鹽