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產(chǎn)品中心

PRODUCTS CNTER

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白

糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白
產(chǎn)品簡介

糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:變異鏈球菌探針法熒光定量PCR試劑盒Streptococcus mutans表皮葡萄球菌(SE)核suan檢測試劑盒表皮葡萄球菌PCR檢測試劑盒Staphylococcus epidermidisPCR表皮葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒Staphylococcus epidermidis丙suan桿菌通用PCR檢測試劑盒Propioniba

更新時間:2023-03-21
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:311
產(chǎn)品型號:
詳細介紹在線留言

公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Glycogen Phosphorylase, Muscle (PYGM)

GPMM; Phosphorylase,Glycogen; McArdle Syndrome,Glycogen Storage Disease Type V; Myophosphorylase

酶與激酶

代謝通路

內(nèi)分泌學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::細胞質(zhì)

預(yù)測分子量:21.7kDa

實際分子量:26kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Arg11~Gly187 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:5.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點:

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human NRXN1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human CRHR2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SIGMAR1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SMYD2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

圖片6.png



標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

JAK1產(chǎn)品名稱: 蛋白質(zhì)酪氨suan激meiJAK-1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

ALT1產(chǎn)品名稱: 谷丙氨suan氨基轉(zhuǎn)移mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow

SLAMF9產(chǎn)品名稱: CD2F-10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse

HIF-1 Alpha產(chǎn)品名稱: 缺氧誘導(dǎo)因子1α /低氧誘導(dǎo)因子-1抗體產(chǎn)品別名: HIF-1a; HIF-1α;

IP3 receptor產(chǎn)品名稱: 5-三磷suan肌醇受體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

Bak產(chǎn)品名稱: Bcl-2同源拮抗劑抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

ZFPL1產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白樣1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

SLC23A3產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體家族蛋白23成員A3抗體交叉反應(yīng): Mouse

epitope tag; Hexa His tag; HHHHHH epitope tag; HHHHHH tag; Histidine.

FIS1產(chǎn)品名稱: 線粒體裂變1蛋白重組鼠單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse
糖原磷酸化酶M(PYGM)重組蛋白人亮氨酰-半胱氨酰氨肽mei(LNPEP)ELISA試劑盒LNPEP亮氨酰-半胱氨酰氨肽meielisa kitHuman LNPEP ELISA Kit

人亮氨suan富含重復(fù)絲氨suan/蘇氨suan蛋白激mei2(LRRK2)ELISA試劑盒LRRK2亮氨suan富含重復(fù)絲氨suan/蘇氨suan蛋白激mei2ELISA試劑盒Human LRRK2 ELISA kit

人亮氨suan氨基肽mei3(LAP3)ELISA試劑盒LAP3亮氨suan氨基肽mei3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human leucine aminopeptidase 3,LAP3 ELISA Kit

人鏈激mei(SK)ELISA試劑盒SK鏈激meielisa檢測試劑盒Human Streptokinase,SK ELISA Kit

人連蛋白(zonulin)ELISA試劑盒zonulin連蛋白elisa kitHuman zonulin ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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