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021-59162051

產(chǎn)品中心

PRODUCTS CNTER

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心天然蛋白、重組蛋白重組蛋白/RP?;视图っ?AGK)重組蛋白

?;视图っ?AGK)重組蛋白
產(chǎn)品簡介

?;视图っ?AGK)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:蛋白激meiCζ(PKCz)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Kinase C Zeta (PKCz)胰脂肪mei(PL)重組蛋白英文名稱:Recombina Pancreatic Lipase (PL)蛋白激meiCζ(PKCz)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Kinase C Zeta (PKCz)

更新時間:2023-03-22
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:548
產(chǎn)品型號:
詳細(xì)介紹在線留言

圖片6.png


公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:酰基甘油激酶(AGK)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Acylglycerol Kinase (AGK)

MULK; Multiple Substrate Lipid Kinase

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 線粒體

預(yù)測分子量:61.6kDa

實際分子量:62kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Thr15~Pro300 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:8.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human Hikeshi宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human HNRNPK宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human QPCTL宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human Drebrin宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點:

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

WDFY3產(chǎn)品名稱: WDFY3蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

C6orf165產(chǎn)品名稱: 6號染色體開放閱讀框165抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

HMGB4產(chǎn)品名稱: 高遷移率族蛋白B4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

TLR4產(chǎn)品名稱: Toll樣受體4(CD284)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep

DCTN3產(chǎn)品名稱: 動力蛋白激活蛋白亞基3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

LECT1產(chǎn)品名稱: 白細(xì)胞衍生化學(xué)吸引su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig

應(yīng)用類型: 標(biāo)簽抗體???英文名稱: Trx-Tag英文別名: Thioredoxin; ADF; Surface associated sulphydryl protein; Thioredoxin-1; Thioredoxin 1; Thioredoxin1; TXN protein; ADF; ATL derived factor; DKFZp686B1993; MGC61975; SASP; Surface associated sulphydryl protein; Surface-associated sulphydryl protein; TRDX; TRX 1; TRX; TRX1; TXN; TXN; ATL derived factor; ATL-derived factor; THIO_HUMAN; zgc:92903; Trx-Tag.

SERPINB10產(chǎn)品名稱: 絲氨suan蛋白mei劑B10抗體交叉反應(yīng): Human

LIR-6/LILRA1產(chǎn)品名稱: 白球蛋白樣受體6抗體交叉反應(yīng): Human

CYB561D1產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞色suB561結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
酰基甘油激酶(AGK)重組蛋白人無翅型MMTV整合位點家族成員7B(WNT7B)ELISA試劑盒WNT7B無翅型MMTV整合位點家族成員7BELISA試劑盒Human Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7B(WNT7B)ELISA Kit

人無翅型MMTV整合位點家族成員7A(WNT7A)ELISA試劑盒WNT7A無翅型MMTV整合位點家族成員7Aelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7A(WNT7A)ELISA Kit

人無翅型MMTV整合位點家族成員5B(WNT5B)ELISA試劑盒WNT5B無翅型MMTV整合位點家族成員5Belisa檢測試劑盒Human Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B(WNT5B)ELISA Kit

人無翅型MMTV整合位點家族成員2(WNT2)ELISA試劑盒WNT2無翅型MMTV整合位點家族成員2elisa kitHuman Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2(WNT2)ELISA Kit

人無翅型MMTV整合位點家族成員11(WNT11)ELISA試劑盒WNT11無翅型MMTV整合位點家族成員11ELISA試劑盒Human Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 11(WNT11)ELISA Kit


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